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【薬学理論】生物

  • 生物

    820%

※数字(%)は出題頻度

マウスのある細胞において、タンパク質（ア）及び（イ）の産生は転写因子Ｘにより調節されている。両タンパク質の産生に対するその転写因子の機能を明らかにするため、以下の siRNA（低分子干渉 RNA）導入実験を行った。実験方法、原理と考察に関する記述のうち、適切なのはどれか。２つ選べ。

【実験】 転写因子Ｘに対する siRNAを導入しない細胞Ａ及び導入した細胞Ｂを 24時間培養した。その後、細胞を破壊し、全タンパク質を回収して、それぞれ試料Ａ及びＢとした。同一タンパク質量の試料Ａ及びＢを用いて SDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、分離されたゲル中のタンパク質をニトロセルロース膜に転写した。次に、そのニトロセルロース膜においてタンパク質（ア）及び（イ）に対する特異的抗体を用いた抗原抗体反応を行った。その結果、図のようにそれぞれのタンパク質に特異的なバンド（黒色）を検出した。なお、実験に用いた siRNAは特異的に転写因子Ｘの mRNAをノックダウンすること、そのノックダウン効果は培養 24時間の時点で最大となること、さらにタンパク質（ア）及び（イ）のニトロセルロース膜への転写効率に差がないことを確認している。

M：あらかじめ色素にて標識した分子量の異なる既知タンパク質を電気泳動時の分子マーカーとして泳動した。

  • (1)

    • 転写因子Ｘの遺伝子が存在する染色体が、導入された siRNAにより破壊される。

    • 図は、サザンブロット法を用いて得られた結果である。

    • 転写因子Ｘは、タンパク質（ア）をコードする遺伝子の転写を抑制的に調節していると考察される。

    • タンパク質（イ）の産生は、転写因子Ｘにより抑制的に調節されると考察される。

    • 転写因子Ｘの siRNAによるノックダウン効果は、細胞Ｂをさらに培養することにより減弱すると予想される。

出題頻度について
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